Purification and characterization of a new PLA2 of whole venom of Micrurus spixii

Resumen

Fue purificado una nueva PLA2, con actividad miotóxica del veneno de Micrurus spixii con un alto grado de pureza y homogeneidad molecular, mediante dos pasos cromatográficos: cromatografía de exclusión molecular G-75 (1 cm x 60 cm) y cromatografía liquida de alta presión de fase reversa (RP-HPLC). La electroforesis en SDS-PAGE muestra una masa molecular ~14 KDa, que fue confirmado por la espectrometría de masa MALDI-TOF con una masa molecular de 14149.005 Da. Esta nueva PLA2 mostró un potente efecto miotóxico local (vía intramuscular) así como sistémico (vena caudal) en ratones, a una concentración de 20ug/ml y una elevada actividad inflamatoria a una concentración de 5ug/ml. La reproductibilidad de la actividad biológica, a través de los efectos farmacológicos, solo es posible con la utilización de fracciones químicamente homogéneas que mantengan la integridad de la función biología.